15814008661一、 无菌室设计要求
1、演播室应小而平，面积约4平方米，高度2.2-2.3米，室内装修应平整平整，无凹凸、棱角等现象，四壁及屋顶应采用不透水材料，便于擦洗消毒
2、室内照明面积大，从外面可以看到室内情况。
3、为保证无菌室的清洁，无菌室四周设置缓冲走廊，走廊旁设置缓冲间，缓冲间可小于无菌室。
4、无菌室、缓冲走廊、缓冲室设置荧光灯、紫外线灯对空气进行消毒。消毒紫外线灯应距工作台1米，其电源开关应设在室外。
5、无菌室、缓冲室进出口设滑动门。门与窗平齐，门缝密封严密。两扇门应错开，避免空气对流造成污染。
二、 无菌室的使用与管理
（1） 无菌室应保持干净整洁，只存放必要的检验工具，如酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环、玻璃笔等，不得放置与试验无关的物品
（2） 室内检查工具、工作台、工作台应固定放置，不得随意移动。
（3） 工作台、门窗、桌椅、地板每2-3周用2%碳酸水溶液擦拭一次，然后用3%碳酸水溶液喷洒空气消毒，最后用紫外线灯消毒半小时
（4） 定期检查室内空气的无菌性。细菌数量应控制在10以下。如不符合要求，应立即彻底消毒/无菌室无菌检查方法：取普通肉汤琼脂平板3片，改良马丁培养基平板3片（每个平板直径9 cm），放置在无菌室各工作位置，打开盖子，暴露半小时，然后把它们倒过来培养。所测细菌总数应在37℃恒温箱中培养48小时；测量霉菌数量时，应置于27℃恒温箱中5天。细菌和霉菌总数不得超过10个。
（5） 无菌室灭菌前，应将所有物品放置在操作位置（待测物品除外），然后打开紫外线灯灭菌30分钟。时间到了，关闭紫外线灯备用
（6） 进入无菌室前，必须在缓冲室内更换已灭菌的工作服、帽、鞋。
（7） 严格按照无菌操作的规定进行操作。操作时少说话，无噪音，保持环境无菌状态。
（8） 吸吮菌液时，必须用耳球吸吮，不要用嘴直接接触吸管。如果吸管碰到您的手和其他未经消毒的物体，必须重新更换，以防污染。
（9） 接种针每次使用前后必须进行火焰燃烧灭菌。冷却后，可接种培养物。
（10） 含菌液的吸管、试管等器具应浸泡在含5%赖氨酸溶液的消毒桶内消毒，24h内取出清洗；培养皿应在高压釜中再次灭菌，然后才能处理营养培养基。切记不要直接冲入下水道，以免堵塞。如果菌液溅到桌面或地面上，应立即用5%的碳酸溶液或3%的赖氨酸溶液在污染处翻转至少30min，然后进行处理。当工作服、帽被菌液污染时，应立即取出，经高压蒸汽灭菌后清洗。
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