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PCR实验室功能设备及装修注意事项

发布时间:2023-11-08 浏览:56次

PCR实验室原则上由四个独立的工作区组成:试剂制备区、样品制备区,扩增区和扩增产物分析区,并设有专用走廊。每个工作区应有缓冲室,工作区和缓冲室之间应安装联锁装置。不同功能的工作区域应分开独立,每个工作区域都有明确的标志,不能直接连接。如果它们连接紧密,则需要安装项目传输窗口。前两个区是扩增前区,后两个区为扩增后区,包括试剂准备区、样品准备区、PCR扩增室和产物分析室。不允许逆流。实验室中的气流也应从扩增前区域流向扩增后区域,不应朝相反方向流动。紫外线灯应安装在每个工作区域的顶部,波长为254mm,每20平方米安装40W紫外线灯。

PCR实验室功能设备及装修注意事项

一、 各试验区功能及主要设备

1.试剂配制区:主要负责试剂的配制、分装、主要反应混合物的配制。试剂盒中用于样品生产的材料应直接运输到该区域。试剂原料必须储存在该区域,并配制成所需的试剂。该区域的主要设备包括天平、冰箱、离心机、采样器、振荡器等。对该区域的气流压力控制没有严格要求,通常为+10Pa。

2.样品制备区:主要负责样品保存、核酸提取、储存、加扩增反应管、DNA合成测定。该区域的主要设备包括冰箱、生物安全柜、离心机、采样器、振荡器等。该区域的压力梯度要求为:相对于邻近区域的正压,以避免气溶胶污染从邻近区域进入该区域,一般为+10Pa。

3.扩增区:主要用于DNA扩增。此外,添加制备的DNA模板(来自样品制备区域)和从主反应混合物制备反应混合物(来自试剂制备区域的)也可以在该区域中进行。该区域的主要设备包括:扩增仪、冰箱、离心机、采样器等。该区域的压力梯度要求为:相对于相邻区域的负压,以避免该区域的气体泄漏,一般为-25Pa。

4.扩增产物分析区:扩增产物的测定。该区域的主要设备包括酶标记、洗板机、采样器和水浴器。该区域的压力梯度要求为:相对于邻近区域,为负压,通常为-25Pa,以避免扩增产物从该区域扩散到其他区域

二、 PCR实验室的通风系统和压力控制

每个区域之间应该有一个单间实验流程、物流、人员流动和气流,形成单向流动保护屏障,避免实验室之间的相互干扰,防止气溶胶扩散污染实验过程。

PCR实验室没有严格的净化要求,但为了避免各个实验区交叉污染的可能性,建议采用全供全排气流组织形式,并严格控制供排空气的比例,以确保各个实验区的压力要求。

三、 PCR实验室装修

实验室围护结构应牢固,气密性好;所有阴阳角均应采用圆弧过渡;墙面内壁光滑、无尘、耐腐蚀,易于清洁消毒;地面应采用PVC卷材或环氧树脂自流地板,材料应符合无缝隙、无渗漏、平整、耐腐蚀的要求。

四、 PCR实验室注意事项

1.包括试剂制备区、扩增区和扩增产物分析区在内的几个区域的大小设置在空间上可以相对较小。样品制备区应配备生物安全柜和低温冰箱,空间应更大。

2.试剂制备区和样品制备区配备应急洗眼器,以确保操作人员的安全。

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